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食品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉以及脫氫乙酸的同時分析

更新時間：2021-02-22 點擊次數(shù)：2685次

安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉以及脫氫乙酸均為食品添加劑，安賽蜜、糖精鈉為甜味劑，苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸為防腐劑。我們這次嘗試將五種食品添加劑共同分析，以提高檢測效率。

GB5009.28-2016條件下分析

首先，我們嘗試按照GB5009.28-2016食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定項下方法，使用SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色譜柱，對安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸混合標(biāo)準(zhǔn)品進行分析。

結(jié)果如下圖所示，在國標(biāo)原條件下可達到五種物質(zhì)分離度大于2.5的良好分離結(jié)果（峰上所標(biāo)數(shù)值為分離度）。

HPLC Conditions ：

色譜柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動相：20 mmol/L 乙酸銨：甲醇=95:5

流速：1.0 mL / min

溫度：35 °C

檢測：PDA 230 nm

濃度：各約0.1 mg/mL

進樣量：10 µL

隨后，我們嘗試使用SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色譜柱在相同條件下，對市售飲料及糕點實際樣品進行分析，結(jié)果如下圖所示，飲料樣品中未檢出五種添加劑，糕點樣品中可檢出山梨酸、脫氫乙酸峰，整體分離結(jié)果及峰形良好。

HPLC Conditions ：

色譜柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動相：20 mmol/L 乙酸銨：甲醇=95:5

流速：1.0 mL / min

溫度：35 °C

檢測：PDA 230 nm

濃度：40 mg/mL

進樣量：10 µL

樣品：飲料樣品：以水為稀釋劑稀釋至40 mg/mL；糕點樣品：稱取樣品400 mg于10 mL容量瓶中，加5 mL水超聲20min，冷卻后加入400 µL 92 g/L的和400 µL 183 g/L的乙酸鋅溶液，加水定容超聲5 min，離心，過濾。

國標(biāo)原流動相基礎(chǔ)上加甲酸進行分析

為了進一步改善脫氫乙酸峰形及各物質(zhì)間分離，我們嘗試在國標(biāo)流動相基礎(chǔ)上加入2 mmol/L甲酸，同時為避免酸性物質(zhì)保留過強，采用梯度洗脫的方式來進行分析。結(jié)果表示，本方法可在20 min內(nèi)得到五種物質(zhì)分離度大于4.9的良好分離結(jié)果，且各峰峰形均得到明顯改善。但由于甲酸的加入導(dǎo)致出峰順序有所改變，苯甲酸、山梨酸保留有所延長。

下圖分別為采用此流動相方法分別對混合標(biāo)準(zhǔn)品和實際樣品的分析結(jié)果。

HPLC Conditions ：

色譜柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動相：A：20 mmol/L 乙酸銨+2 mmol/L甲酸 B：甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速：1.0 mL / min

溫度：35 °C

檢測：PDA 230 nm

濃度：各約0.1 mg/mL

進樣量：10 µL

HPLC Conditions ：

色譜柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動相：A：20 mmol/L 乙酸銨+2 mmol/L甲酸 B：甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速：1.0 mL / min

溫度：35 °C

檢測：PDA 230 nm

濃度：40 mg/mL

進樣量：10 µL

樣品：飲料樣品：以水為稀釋劑稀釋至40 mg/mL；

糕點樣品：稱取樣品400 mg于10 mL容量瓶中，加5 mL水超聲20 min，冷卻后加入400 µL 92 g/L的亞鐵和400 µL 183 g/L的乙酸鋅溶液，加水定容超聲5 min，離心，過濾。

使用4.6x150 mm規(guī)格色譜柱進行分析

為了縮短分析時間，我們也嘗試使用GB5009.28-2016方法以及上面提到的國標(biāo)原流動相基礎(chǔ)上加甲酸的方法，使用4.6x150 mm規(guī)格的SUPERIOREX ODS色譜柱，對安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸混合標(biāo)準(zhǔn)品進行分析。如下面結(jié)果所示，使用150 mm柱長的色譜柱，可以縮短分析的時間。

HPLC Conditions ：

色譜柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×150 mm

流動相：20 mmol/L 乙酸銨：甲醇=95:5

流速：1.0 mL / min

溫度：35 °C

檢測：PDA 230 nm

濃度：安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸各約0.1mg/mL；山梨酸、脫氫乙酸各約0.067 mg/mL

進樣量：10 µL

HPLC Conditions ：

色譜柱：SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×150 mm

流動相：A：20 mmol/L 乙酸銨+2 mmol/L甲酸 B：甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速：1.0 mL / min

溫度：35 °C

檢測：PDA 230 nm

濃度：各約0.1 mg/mL

進樣量：10 µL

總結(jié)

綜上所述，按照GB5009.28-2016食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定項下方法，無論使用柱長150 mm還是250 mm的SUPERIOREX ODS色譜柱，均可得到安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉以及脫氫乙酸五種食品添加劑混合標(biāo)準(zhǔn)品的基線分離結(jié)果。

流動相中加酸的梯度條件可明顯改善色譜峰形及分離，但苯甲酸、山梨酸保留會變強，五種物質(zhì)出峰順序較國標(biāo)原方法會有所變化。若想進一步改善糖精鈉、苯甲酸之間的分離度，可適當(dāng)延長初始有機相運行時間。

本次所選的飲料樣品中不含本次檢測的五種食品添加劑；糕點樣品中檢出山梨酸、脫氫乙酸。使用250 mm柱長的SUPERIOREX ODS色譜柱可得到兩種樣品的良好分析結(jié)果。

由于食品樣品多種多樣，本次只選擇兩種樣品，很難說具有廣泛代表性，客戶可根據(jù)自己的樣品情況對分析條件進行進一步優(yōu)化。

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